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2007~2009年全国淋球菌耐药监测实验室药敏试验室间质评结果分析

来源:我的网站 浏览:2079

  淋病是我国流行的主要性传播疾病,目前治疗该病的主要药物是抗生素,细菌的变异及不规则用药可导致耐药菌株的出现,因此,淋球菌耐药成为世界关注的严重公共卫生问题之一。中国疾病预防控制中心性病控制中心自1987年起就组织开展了全国淋球菌耐药监测研究工作,并于1992参加了 WHO 西太区淋球菌耐药监测规划协作组,成为WHO西太区淋球菌耐药监测网络之一。为了贯彻执行《中华人民共和国传染病防治法》,进一步落实《卫生部办公厅关于进一步加强性病监测工作的通知》精神,加强全国淋球菌耐药监测工作,中国疾病预防控制中心性病控制中心于2007-2009年间开展了全国淋球菌耐药监测实验室药敏试验室间质量评价活动,现将3年来全国淋球菌耐药监测实验室药敏试验室间质量评价结果报告如下:
  1.材料与方法
  1.1质评对象 全国淋球菌耐药监测点并能开展淋球菌药敏试验的单位。每年参评的单数分别为:2007年10家,2008年10家,2009年15家。3年间共发放质评考核样本105份。
  1.2 质评样本的制备及组成
制备 由中国疾病预防控制中心性病控制中心统一制备,采用冷冻干燥法。将待发的质评样本大量增菌后,用无菌脱脂牛奶作保护剂,将样本制成冻干品。同时对样本的状态进行了检测,主要包括样本的均匀性、稳定性及无污染试验,以保证质评样本的质量。
组成 2007~2009年间的室间质评考核样本均由3份样本组成,样本的编号分别为:07QA1、07QA2、07QA3;08QA1、08QA2、08QA3;09QA1、09QA2、09QA3。
  1.3 质评样本的检测方法 各实验室参照全国淋球菌耐药监测实施方案及质评的说明与要求对质评样本进行检测,由常规实验人员进行操作。质评样本的检测应与临床标本一起检测。各实验室在规定的时间内进行实验,并将实验结果回报中国疾病预防控制中心性病控制中心。
  1.4 质评样本的预期结果 考核样本均为已知样本,由WHO西太区提供。预期结果的确定参考WHO西太区给定的MIC值。
  1.5 评分标准 按淋球菌耐药监测实施方案,质评样本MIC值控制在参考值上下1个浓度范围来评定回报结果的符合率。符合率≥85%为合格,<85%为不合格 ,全部符合为优秀。
  2.结果
  2.1结果的回报情况 2007~2009年间共对13个淋球菌耐药监测点发放室间质评考核样本共计105份。各年结果的回报率分别为: 2007年回报率为90%(27/30);2008年回报率为90%(27/30);2009年回报率为86.67%(39/45);3年间的总体回报率为88.57%(93/105)。

表1 2007~2009年间淋球菌药敏试验室间质评结果的回报率

年份
发放样本数
结果的回报数
结果的回报率(%)
2007
30
27
90(27/30)
2008
30
27
90(27/30)
2009
45
39
86.67(39/45)
合计
105
93
88.57(93/105)

  2.2质评样本的考核成绩 2007~2009年间全国共有13个淋球菌耐药监测点参加了本项室间质评活动,连续3年均参加的有9家,2009年新增了4家。2007年有9家单位参评,≥85分的有6家,合格率为66.67%(6/9);2008年有9家单位参评,≥85分的有7家,合格率为77.78%(7/9);2009年有13家单位参评,≥85分的有11家,合格率为84.62%(11/13);3年间质评考核成绩的总体合格率为77.42%(24/31)。

表2 2007~2009年间淋球菌药敏试验室间质评考核成绩

参评实验室
考核成绩(分)
年 份
参评数
100
85~99
60~84
<60
≥85(%)
2007
9
4
2
2
1
6(66.67)
2008
9
4
3
1
1
7(77.78)
2009
13
4
7
1
1
11(84.62)
合计
31
12
12
4
3
24(77.42)

  2.3抗生素MIC值的符合率 质粒介导的产青霉素酶淋球菌菌株(PPNG)由2007年81.48%(22/27) 上升到2009年的97.44%(38/39);环丙沙星由2007年的85.19%(23/27)上升到2009年的92.31%(36/39);大观霉素由2007年的88.89%(24/27)%上升到2009年的94.87%(37/39);而头孢曲松由2007年的74.07%(20/27) 下降到2009年的71.79%(28/39);质粒介导的高度耐四环素菌株(TRNG)由2007年的88.89%(24/27)下降到87.18%(34/39)。每种抗生素的MIC值总体符合率分别为:PPNG(89.27%)、头孢曲松(78.25%)、环丙沙星(85.09%)、大观霉素(93.35%)、TRNG(87.09%)。

表3 2007~2009年间药敏试验室间质评抗生素MIC值的符合率

年份
PPNG(%)
头孢曲松(%)
环丙沙星(%)
大观霉素(%)
TRNG(%)
2007
81.48
74.07
85.19
88.89
88.89
2008
88.89
88.89
77.78
96.30
85.20
2009
97.44
71.79
92.31
94.87
87.18
合计
89.27
78.25
85.09
93.35
87.09

  3.讨论
  抗菌药物是指具有杀菌或抑菌活性的,由真菌、放线菌、细菌等产生的代谢产物(抗生素)、经化学改造的半合成抗生素和化学合成药物,可治疗由细菌引起的多种感染病。对临床医生而言,抗菌药物敏感性试验(antimicrobial susceptibility test,AST)的结果比病原体检查更为重要,其意义在于:①可预测抗菌治疗的效果,即AST试验结果为"敏感"时,治疗可能有效;反之,试验结果为"耐药",治疗肯定失败;②指导临床医生选择使用抗生素,报告AST的结果往往在给予病人经验性治疗24~48小时之后,若AST结果为"敏感",则该治疗有效,若结果为"耐药"则应立即更换药物;③提供选择药物的依据。
  然而,目前检测淋球菌药敏试验的方法较多,分别有纸片扩散法、E-test法及琼脂稀释法。而琼脂稀释法是目前测定淋球菌药物敏感性试验最为准确的方法,重复性好,结果较为可靠,所获的资料可作为对当地流行菌株监测的依据。文中的药物敏感性室间质评试验则为琼脂稀释法。琼脂稀释法是将药物混匀于琼脂培养基中,各个平板含不同浓度的药物,使用多头接种器接种细菌,经孵育后观察细菌的生长情况,以抑制细菌生长的琼脂平板所含的药物浓度测得的MIC。本法的优点是可同时作多株菌株的MIC测定,结果的可靠性优于肉汤稀释法,且易发现污染或耐药交叉株,是开发新药的体外药敏试验常用的经典参照标准;缺点是制备含药琼脂费时费力。
  为了保证淋球菌耐药监测点药物敏感性试验检测结果的精确性、可靠性和可重复性,规范试验中使用的各种试剂,规范操作者的操作规程和对结果的判断,中国疾病预防控制中心性病控制中心于2007~2009年间开展了全国淋球菌耐药监测实验室药物敏感性试验室间质量评价活动。从表1可看出,室间质评的参评数在增加,由2007年的10家增加到2009年的15家,结果的总体回报率为88.57%(93/105)。由表2可见,质评考核成绩的合格率在上升,由2007年的66.67%(6/9)上升到2009年的84.62%(11/13),质评考核成绩的总体合格率为77.42%(24/31)。由表3可见,各抗生素的总体符合率大观霉素最高,符合率为93.35%;头孢曲松最低,符合率只有78.25%;环丙沙星、TRNG及PPNG的总体符合率介于85.09%~89.27%之间,分别为:85.09%、87.09%、89.27%。通过3年的室间质评活动,我们发现PPNG、环丙沙星和大观霉素的符合率提升较快,而TRNG的符合率则略有下降,头孢曲松的药物敏感性试验的符合率处于波动状态,2008年的符合率较2007年有所提高,2009年则随着新增点的加入,符合率有所下降。后两种药物敏感性试验符合率下降的原因归纳如下:①新技术人员缺乏培训,对判定的标准未掌握,例:TRNG的判定标准应为MIC≥16mg/L,从回报的结果显示,有部分点误认为MIC≥8mg/L而导致结果误判,这点应引起重视;②头孢曲松药敏结果不易判读,易将薄雾状生长误认为有菌生长,这样可导致该株菌的MIC值偏高;③有些单位因比浊设备,其菌悬液的浓度无法把握;④配制的抗生素平皿放置时间过久。
  总体来说,影响药物敏感性试验的因素可归纳为以下几点:①细菌菌液浓度;②培养基的保质期和储存温度;③孵箱的温度和气体条件;④质控菌株被污染;⑤培养基平板的厚度和浇注后保存的时间。此外,在抗菌药物敏感性试验时还必须附加质控对照试验,主要包括生长对照、纯度对照、接种对照和结果终点判读对照。结果的判读:是在质控菌株试验结果正确的基础上,将平板置于暗色、无反光表面上判读试验终点,以抑制细菌生长的药物稀释度为终点浓度。如果出现有2个以上菌落生长在含药浓度高于终点水平的琼脂平板上,或在低浓度药物琼脂平板上不生长而在高浓度药物琼脂平板上生长的现象,则应检查是否为污染菌,应重复试验给予排除。
  质量控制能够客观地反映实验室的水平,对保证和监督细菌检验质量起到重要作用。临床微生物检验质量控制分为两大方面,一是室内质控,旨在检测和控制常规工作中的各个环节, 确保实验结果的准确可靠。二是室间质评, 它应是在室内质控的基础上进行, 目的是通过实验室间的比对,观察各实验室间结果的准确性、一致性,并采取一定措施使各实验室结果趋于一致,具有可比性。

中国疾病预防控制中心性病控制中心 戴秀芹 尹跃平


今天是
 

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